Os objetivos do presente
projeto dividem-se em quatro grandes eixos, quais sejam, I.
Institucionais, II. Pesquisa, III. Formação de recursos humanos e IV.
Transferência de conhecimento para a comunidade e setor produtivo.
1) Implantação do Instituto
de Pesquisa Translacional em Medicina (IPTM), formalizando sua atuação
no cenário da pesquisa brasileira;
2) Desenvolvimento nos
diferentes grupos constitutivos do Instituto a integração das atividades
de pesquisa, de forma sinérgica com o foco na pesquisa translacional;
3) Equipar os laboratórios
participantes com tecnologia inovadora para desenvolvimento da pesquisa
translacional, especialmente ligada a proteômica.
4) Formação de pessoal
qualificado de nível acadêmico através de posições de pósgraduação e
treinamento para empresas
5) Criação de cursos e
disciplinas focados na medicina translacional nos programas de
pós-graduação associados ao grupo proponente.
Figura 1. Metas do Instituto de Pesquisa de Medicina Translacional.
II. Pesquisa
Objetivos principais:
Os objetivos principais
se referem à análise antes e depois das intervenções farmacológicas
descritas, incluindo a coleta de soro e tecido cerebral (no caso de
modelos animais) para análise proteômica e transcriptômica na linha de
base e após intervenção.
1. Desenvolvimento do uso
terapêutico da N-acetil-cisteína através de ensaios clínicos para o
tratamento da esquizofrenia e depressão bipolar. No caso do ensaio
clínico randomizado de esquizofrenia, o mesmo já foi realizado em
humanos, incluindo coleta de soro antes e depois.
2. Investigação do uso
clínico da tianeptina como tratamento para a depressão bipolar. Ensaio
clínico randomizado em humanos, incluindo coleta de soro antes e depois
do tratamento para análise proteômica e transcriptômica.
3. Desenvolvimento do uso
terapêutico do Canabidiol em transtornos de ansiedade social. Ensaio
clínico randomizado em humanos, incluindo coleta de soro antes e depois
do tratamento para análise proteômica e transcriptômica.
4. Prospecção do uso de
derivados da ayahuaska em modelo animal de ansiedade. Inclui a coleta se
soro e tecido cerebral dos animais para análise proteômica e
transcriptômica.
5. Prospecção do uso
terapêutico de agonistas e antagonistas de receptores de neuropeptídeos,
com foco no Gastrin releasing peptide receptor (GRPR), como fármacos
anti-tumorais (Câncer de cólon). Cultura celular antes e depois da
incubação com pool de agentes que atuam no GRPR.
6. Prospecção do uso
clínico do BDNF como: a) marcador de atividade; b) marcador de
estadiamento; c) marcador e resposta terapêutica nos transtornos
psiquiátricos maiores (esquizofrenia e transtorno bipolar). Neste caso
não há intervenção farmacológica, e as fases da doença funcionam como
intervenções.
7. Prospecção do uso
clínico de marcadores de estresse oxidativo como: a) marcador de
atividade; b) marcador de estadiamento; c) marcador e resposta
terapêutica nos transtornos psiquiátricos maiores (esquizofrenia e
transtorno bipolar). Neste caso (como acima) não há intervenção
farmacológica, e as fases da doença funcionam como intervenções.
8. Prospecção do uso
terapêutico de agentes que afetam mecanismos epigenéticos, promovendo o
relaxamento da cromatina (por exemplo, inibidores de deacetilase de
histonas) como potenciais medicamentos anti-tumorais (câncer de cólon).
Para este tópico ainda não foi especificamente selecionada a
intervenção. Atualmente está sendo prospectado o butirato de sódio para
esta finalidade.
9. Prospecção do uso
terapêutico de agentes quelantes de ferro como potenciais medicamentos
facilitadores cognitivos. Aqui são usados modelos animais de memória, de
forma que é medida a interação do aprendizado com a intervenção
(quelantes de ferro). Como no caso acima, está programado o uso de
desferoxamina para esta finalidade e outros quelantes estão sendo
prospectados.
10. Prospecção do uso
terapêutico de agentes que alteram a sinalização intracelular, por
exemplo, inibidores da fosfodiesterase tipo 4 e agonistas
dopaminérgicos, como potenciais medicamentos facilitadores cognitivos.
São também aplicadas as observações acima.
Objetivos específicos:
Cada um destes 10
objetivos principais, que formam o eixo central do programa de pesquisa
do instituto, pode ser desdobrado (ou não) em objetivos específicos, de
acordo com o fluxograma descrito na figura 2,
envolvendo os métodos
descritos abaixo. Resultando em metas de curto, médio e longo prazo,
quais sejam:
1. identificação de
proteínas-alvo (curto);
2. validação das
proteínas como alvo terapêutico (médio);
3. teste e/ou patente de
produtos inovadores a partir dos alvos identificados (longo prazo).
O grupo adotou como meta
de produtividade a publicação de 100 artigos internacionais/ano e o
depósito de duas patentes internacionais no final dos 5 anos do
exercício. Para contemplar estes objetivos, em etapas sinérgicas e
concatenadas serão utilizadas os procedimentos abaixo:
1. Para avaliação do
efeito farmacológico o IPMT contará com modelos experimentais In vitro
(cultivo de células) e In vivo (modelos animais de doenças psiquiátricas
e câncer).
2. Na busca de
biomarcadores lançaremos mão do uso de transcriptômica (RTPCR
semi-quantitativo, qRT-PCR e microarray) e proteômica (proteoma,
redoxproteoma e fosfo-proteoma usando eletroforese bidimensional,
seguido de identificação em espectrometria de massas).
3. Para a avaliação dos
efeitos biológicos das drogas sobre os modelos contaremos com:
a. Avaliação da atividade dos receptores em tecidos (western
blotting,ensaios de quinases, ELISA e microdissecação de tecidos)
b. Avaliação da viabilidade celular para modelos de cultura de
células (ensaio de MTT, método clonoginica e marcador de
vabilidade/apoptose Anexina V Cy3)
c. Avaliação da proliferação celular para modelos de cultura de
células (Contagem celular por microscopia e citometria de fluxo)
d. Identificação de Segundos Mensageiros e fatores de transcrição
(imunoprecipitação, EMSA e ensaios repórter)
e. Ensaios de Migração e Invasão (cultura celular em ágar e ensaio
em placas com simulador membrana celular)
4. Para a fase de
validação (onde será conferido o mérito do achado como candidato a
transformar-se em novo alvo celular para moléculas terapêuticas)
contaremos com o uso de inibidores farmacológicos para os alvos
protéicos identificados nos diferentes projetos, além de mecanismos
celulares de silenciamento (siRNA; knowout) e super-expressão gênica.
5. Para a fase de ensaios
clínicos o IPTM desenvolverá estudos clínicos de fase II, III e IV para
avaliar o potencial terapêutico das moléculas identificadas pelos itens
anteriores. Atualmente os grupos possuem modelos animais para o estudo
das seguintes drogas: n-acetilcisteína, tianeptina, ketamina, memantina,
butirado de sódio, tamoxifeno, agonista e antagonistas do receptor
GRPR, canabidiol e ayhauaska. Nem todas as técnicas foram incluídas como
objetivos principais, porém devem ser estudadas dentro dos grupos
individuais sem a participação do Instituto para que se cumpram acordos
prévios com as instituições detentoras de propriedade intelectual.
É importante salientar
que o IPMT possui dois eixos centrais que perpassam todos os objetivos
principais: 1. identificação das rotas associadas aos fatores
neurotróficos, em especial o BDNF, e 2. avaliação estresse oxidativo,
lançando mão da redox-proteômica a fim de verificar o perfil de oxidação
das proteínas.
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