Estima-se que no mundo os preju\u00edzos cheguem a US$ 6 bilh\u00f5es em raz\u00e3o de contamina\u00e7\u00e3o e erro de identifica\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas<\/i><\/p>\n
O Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (Inmetro) adotou medidas para evitar desperd\u00edcio em pesquisas cient\u00edficas que utilizam cultivo celular in vitro em \u00e1reas como biotecnologia e toxicologia. Na pr\u00e1tica, foram adotados protocolos para avaliar a qualidade das c\u00e9lulas utilizadas em estudos in vitro, em terapia celular e ensaios toxicol\u00f3gicos, segundo o coordenador da \u00e1rea de Bioengenharia do Inmetro, Jos\u00e9 Mauro Granjeiro.<\/p>\n
Conforme ele entende, a irreprodutibilidade das pesquisas cient\u00edficas utilizando o cultivo celular in vitro \u00e9 uma preocupa\u00e7\u00e3o mundial e gera preju\u00edzos bilion\u00e1rios. Para embasar os argumentos, o especialista identificou 300 mil estudos realizados at\u00e9 agora, utilizando a palavra chave \u201ccell culture\u201d na internet.<\/p>\n
Desse total, estima-se que 20% dos estudos com c\u00e9lulas s\u00e3o contaminadas ou n\u00e3o aut\u00eanticas, representando 60 mil estudos comprometidos. Na ponta do l\u00e1pis, Granjeiro calculou que esses desperd\u00edcios poderiam atingir US$ 6 bilh\u00f5es, se considerar um custo estimado em US$ 100 mil em cada estudo. No Brasil, as primeiras an\u00e1lises do Inmetro identificaram mais de 20% de c\u00e9lulas contaminadas e de cerca de 6% com erro de identifica\u00e7\u00e3o.<\/p>\n
O cultivo celular in vitro \u00e9 uma ferramenta empregada sistematicamente desde o in\u00edcio do s\u00e9culo XX. Mais recentemente, esse m\u00e9todo emergiu como potencial estrat\u00e9gia para reduzir o uso de animais em pesquisa cient\u00edfica.<\/p>\n
Conforme o especialista do Inmetro, os principais fatores que comprometem a qualidade das pesquisas pelo m\u00e9todo in vitro s\u00e3o o risco de contamina\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas por micoplasma (bact\u00e9rias min\u00fasculas), particularmente o Micoplasma orale, \u201ccomumente\u201d encontrado na cavidade oral e orofaringe.<\/p>\n
Risco na identifica\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas<\/b><\/p>\n
Outro elemento fundamental para assegurar a qualidade da pesquisa biom\u00e9dica, utilizando cultivo celular, disse Granjeiro, \u00e9 a determina\u00e7\u00e3o da identidade da c\u00e9lula avaliada no estudo. Segundo disse, h\u00e1 mais de 50 anos se relata a identifica\u00e7\u00e3o incorreta da origem das c\u00e9lulas, cuja taxa de erro \u00e9 de 20%, aproximadamente.<\/p>\n
Segundo ele, v\u00e1rios relatos na literatura cient\u00edfica mostram a troca de c\u00e9lula humana por c\u00e9lula de camundongo, por exemplo. Outro exemplo \u00e9 a identifica\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas de c\u00e2ncer cervical (HeLa) como sendo uma c\u00e9lula epitelial intestinal n\u00e3o maligna.<\/p>\n
\u201c\u00c9 como se, querendo estudar uma Ferrari, o cientista desmontasse um calhambeque: ambos s\u00e3o carros, mas completamente diferentes\u201d, exemplifica Granjeiro.<\/p>\n
Conforme ele avalia, os erros de identifica\u00e7\u00e3o podem invalidar as conclus\u00f5es do estudo \u2013 resultar em desperd\u00edcio de tempo e recursos financeiros e, principalmente, contribuir para a \u201ccontrov\u00e9rsia na literatura cient\u00edfica e confus\u00e3o entre os cientistas.\u201d<\/p>\n
Cuidados na manipula\u00e7\u00e3o<\/b><\/p>\n
A contamina\u00e7\u00e3o e os erros na identifica\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas, segundo Granjeiro, decorrem da manipula\u00e7\u00e3o de m\u00faltiplas linhagens celulares no mesmo laborat\u00f3rio, com risco de contamina\u00e7\u00f5es cruzadas. Ao mesmo tempo, as c\u00e9lulas podem ser rotuladas de forma incorreta durante a manipula\u00e7\u00e3o, gerando erros de identifica\u00e7\u00e3o e, por tabela, irreprodutibilidade das pesquisas cient\u00edficas.<\/p>\n
Para Granjeiro, esses fatores comprometem o resultado final da pesquisa. \u201cO estudo com uma c\u00e9lula n\u00e3o aut\u00eantica, sem saber exatamente a identidade da c\u00e9lula utilizada ou um estudo com c\u00e9lula contaminada, n\u00e3o servem para nada. S\u00e3o tempo e recursos perdidos.\u201d<\/p>\n
No entendimento de Granjeiro, um dos desafios importantes da Ci\u00eancia \u00e9 reproduzir os estudos com c\u00e9lulas animais. \u201cCome\u00e7amos a verificar v\u00e1rios peri\u00f3dicos internacionais, dentre os quais a revista americana Nature, bastantes preocupados com irreprodutibilidade dos estudos\u201d, disse.<\/p>\n
\u201cA preocupa\u00e7\u00e3o \u00e9 t\u00e3o grande que a Nature solicita aos revisores dos artigos que procurem identificar especificamente, na metodologia dos artigos que utilizam cultura celular, se o autor do trabalho fez teste de autenticidade e de micoplasma, justamente para aumentar a confian\u00e7a nos estudos\u201d, acrescenta.<\/p>\n
Preocupa\u00e7\u00e3o nacional<\/b><\/p>\n
O Inmetro passou a dar prioridade a tal assunto a partir do ano passado quando analisou 100 amostras de c\u00e9lulas \u2013 encaminhadas de forma espont\u00e2nea por alguns laborat\u00f3rios brasileiros. Do total recebido, o Instituto identificou contamina\u00e7\u00e3o em 28% das c\u00e9lulas, aproximadamente. Enquanto um percentual menor, de cerca de 6%, apresentou c\u00e9lulas com erros de identifica\u00e7\u00e3o.<\/p>\n
\u201cPor isso, \u00e9 preciso estabelecer boas pr\u00e1ticas de cultivo celular e testar regularmente as c\u00e9lulas no laborat\u00f3rio evidenciando que ela n\u00e3o est\u00e1 contaminada e \u00e9 aut\u00eantica\u201d, recomendou Granjeiro.<\/p>\n
No Brasil, os \u00edndices est\u00e3o em linha com os registrados em pa\u00edses europeus, sobretudo na contamina\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas. Conforme Granjeiro, na Europa, estudos publicados indicam n\u00edveis de contamina\u00e7\u00e3o superior a 25%. Enquanto isso, no Jap\u00e3o estudos publicado em 1981 indicaram taxas de contamina\u00e7\u00e3o superiores a 80% das culturas celulares testadas. \u00c9 o mesmo percentual registrado em estudos publicados no M\u00e9xico em 2009.<\/p>\n
\u201cO importante \u00e9 destacar que as c\u00e9lulas que analisamos foram enviadas espontaneamente para estudo, o que demonstra uma preocupa\u00e7\u00e3o com o tema. Isso mostra, por outro lado, que havia um universo n\u00e3o observado de c\u00e9lulas que n\u00e3o eram testadas.\u201d<\/p>\n
O Inmetro come\u00e7ou a atuar em biometrologia em 2007 com a cria\u00e7\u00e3o da Diretoria de Metrologia Aplicada a Ci\u00eancias da Vida, com o intuito de contribuir para aumentar a confian\u00e7a da sociedade nas medidas no que se refere \u00e0 \u00e1rea de Ci\u00eancias da Vida. Por exemplo, a quantifica\u00e7\u00e3o de produtos biol\u00f3gicos colocados no mercado brasileiro.<\/p>\n
Projeto piloto<\/b><\/p>\n
O coordenador da \u00e1rea de Bioengenharia do Inmetro informou que o resultado das 100 c\u00e9lulas analisadas no ano passado serviu de base para cria\u00e7\u00e3o de um programa piloto do Instituto. Foi a partir da\u00ed que o Inmetro passou a adotar testes de autenticidade e de micoplasma para atender a demanda do mercado \u201cdentro de sua capacidade\u201d.<\/p>\n
Ainda em 2013, o Inmetro realizou 460 an\u00e1lises de c\u00e9lulas, aproximadamente. O resultado de todas essas an\u00e1lises n\u00e3o foi divulgado.<\/p>\n
De janeiro at\u00e9 agosto deste ano foram realizadas 650 an\u00e1lises para detec\u00e7\u00e3o de microplasma, superando todo o ano de 2013. Desse total apurado, 30% das c\u00e9lulas registram contamina\u00e7\u00e3o. Conforme a previs\u00e3o de Granjeiro, o Inmetro deve encerrar o ano com cerca de 1 mil an\u00e1lises realizadas.<\/p>\n
Produ\u00e7\u00e3o de kits<\/b><\/p>\n
Com intuito de disseminar essas an\u00e1lises no Brasil, o Inmetro prev\u00ea a realiza\u00e7\u00e3o de treinamentos e testes, sob demanda. A proposta \u00e9 que os pesquisadores dos pr\u00f3prios laborat\u00f3rios possam fazer os testes, sozinhos. Segundo Granjeiro, ser\u00e3o distribu\u00eddos protocolos \u201cque detalham, passo-a-passo, os procedimentos para os testes\u201d.<\/p>\n
\u201cOs pesquisadores podem comprar os kits para esses ensaios no mercado nacional e, seguindo um protocolo detalhado, poder\u00e3o realizar os ensaios no pr\u00f3prio laborat\u00f3rio. Com isso, poder\u00e3o ter seguran\u00e7a sobre as c\u00e9lulas com as quais trabalham, verificando se s\u00e3o aut\u00eanticas e livres de contamina\u00e7\u00e3o por micoplasma.\u201d<\/p>\n
Fonte: Texto de Viviane Monteiro para Jornal da Ci\u00eancia<\/a><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"