06/10 – SEMINÁRIO DE QUALIFICAÇÃO (Doutorado) – IARA MACÊDO

SEMINÁRIO DE QUALIFICAÇÃO (Doutorado)

IARA MACÊDO

Sistema proteico termoestável para entrega de dsRNA: uma estratégia inovadora para o melhoramento de cultivares agrícolas via RNAi

Orientador: Dr. Rogério Margis

Banca examinadora: Dra. Evelise Bach e Dr. Diego Bonatto

06 de outubro de 2025 (segunda-feira)

10h30min

Presencial: Anfiteatro do Departamento de Genética da UFRGS (Campus do Vale, prédio 43312)

Resumo:

Embora domínios canônicos de ligação a dsRNA, como os dsRBDs, sejam bem caracterizados, domínios alternativos como KH e R3H ainda têm funções pouco compreendidas quanto à interação com RNA de fita dupla (dsRNA). Neste contexto, seis variantes recombinantes da proteína KHpB derivada da bactéria termofílica Marinithermus hydrothermalis (mhKHpB) foram geradas: KHpB12 (KH + R3H), KHpB1 (KH), KHpB2 (R3H) e suas versões fusionadas a peptídeos de penetração celular (cppKHpB12, cppKHpB1, cppKHpB2), com o objetivo de avaliar a contribuição de cada domínio na interação com dsRNA e testar se a fusão com CPPs poderia melhorar a eficiência de penetração em tecidos vegetais. Todas as variantes foram analisadas quanto à capacidade de ligação ao dsRNA, sendo KHpB1 e cppKHpB1 as únicas sem interação detectável nas condições testadas. KHpB12 e KHpB2 foram avaliadas quanto à estabilidade térmica e mantiveram a capacidade de ligação ao dsRNA mesmo após exposição a temperaturas de até 95 °C. Posteriormente, a afinidade de ligação ao dsRNA também foi determinada para KHpB12 e KHpB2, e ambas apresentaram afinidade significativa; no entanto, KHpB2 se destacou por apresentar maior afinidade, indicando que o domínio R3H pode estar atuando como módulo funcional mínimo. Esses resultados caracterizam a mhKHpB como uma nova proteína ligante de dsRNA e evidenciam o potencial das KHpBs como plataformas promissoras para a entrega de ácidos nucleicos em aplicações biotecnológicas.